Ačkoliv se za hnutí ANO dostalo do druhého kola celkem 17 kandidátů, ve druhém kole uspěli jen dva z nich - Věra Procházková v Karlových Varech a Zdeněk Matušek ve Frýdku-Místku. Přidají se tak k Ladislavu Václavcovi, který svůj mandát na Bruntálsku obhájil již v prvním kole. 

Hnutí ANO se pro druhé kolo nepodařilo oslovit nové voliče, jen dvě kandidátky ze sedmnácti dokázaly získat více hlasů než před týdnem. Jana Nagyová na Jihlavsku si polepšila zhruba o tisíc hlasů a ve druhém kole ji volilo 15 495 voličů, Lucie Pluhařová na Kroměřížsku získala o 77 hlasů více než v prvním kole. Ani jedné z nich to však na vítězství nestačilo. 

Za ANO neuspěly ani výrazné tváře regionů. Prohrál například i primátor Ústí nad Labem Petr Nedvědický, primátor Pardubic Martin Charvát, ředitel nemocnice v Tišnově Bořek Semrád, poslanec Milan Brázdil nebo bývalý brněnský primátor Petr Vokřál.